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      速率-區域密度梯度離心/移動區離心

      速率-區域密度梯度離心是一種將顆粒根據其形狀作為大小進行分離的離心方法,并按照相同的密度梯度離心原理進行工作,但工作方式不同。也稱為移動區離心。

      速率-區域密度梯度離心原理

      • 速率區域離心法將顆粒按大小和形狀分級。
      • 該程序是在預先澆注的密度梯度上方的限制區域內分層放置樣品。然后將密度梯度離心。
      • 所有顆粒都遷移到密度梯度中,因為密度梯度的密度僅比要離心的顆粒的密度低得多。
      • 顆粒主要通過尺寸和形狀分級。顆粒越大,沉淀越快。
      • 顆粒的球形對稱性越高,其沉降速度就越快。
      • 顆粒以其沉降系數的函數的速率通過梯度沉降。
      • 與差速離心不同,在樣品的整個區域中都分布有樣品,在速率區域離心中,樣品zui初僅以梯度形式出現在梯度的頂部。

      速率-區域密度梯度離心的步驟

      • 在施加樣品之前,在離心管中制備密度梯度。
      • 然后將它們以帶的形式分層放置在漸變的頂部。
      • 在離心過程中,快速移動的顆粒(較大的尺寸和圓形的形狀)先于較慢的顆粒移動,以便將不同的顆粒分離為梯度的不同部分上的不同譜帶。
      • 顆粒根據其沉降系數進行分離,并從管的底部通過穿孔獲得顆粒。

      速率-區域密度梯度離心的用途

      • 速率分區差速離心已用于分離病毒,因為它們具有每種病毒獨特的大小和密度不同的成分。
      • 該方法已經用于在蔗糖梯度上分離RNA。
      • 此外,速率-區域差速離心也已用于從病毒和細菌中分離,純化和分離DNA分子。
      • 多核糖體和核糖體亞基的分離一直是該方法的zui早應用之一。
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