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      離心類型

      1. 差速造粒(差速離心)
      • 這是zui常用的離心方式。
      • 在包含緩沖液的蔗糖溶液中,將組織(例如肝臟)在32度下均質化。
      • 然后將勻漿置于離心機中,并在恒定溫度下以恒定離心力旋轉。
      • 一段時間后,在離心機底部形成沉淀物,稱為沉淀,上方的溶液稱為上清液。
      • 然后將上層溶液置于另一個離心管中,然后在進行的步驟中以更高的速度旋轉。
      1. 密度梯度離心
      • 這種離心主要用于純化病毒,核糖體,膜等。
      • 通過將較低濃度的蔗糖輕輕覆蓋在離心管中的較高濃度上來創建蔗糖密度梯度
      • 將感興趣的顆粒置于超速離心機的梯度和離心機頂部。
      • 顆粒穿過梯度,直到達到其密度與周圍蔗糖的密度相匹配的點。
      • 除去級分并分析。
      1. 速率-區域密度-梯度離心
      • 帶狀離心也稱為帶式或梯度離心
      • 它依賴于沉降系數的概念(即,沉積物在液體介質中的運動)
      • 在這種技術中,在底部具有蔗糖且高密度的試管中創建了密度梯度。
      • 將蛋白質樣品放在梯度的頂部,然后離心。
      • 通過離心,樣品中沉降速度更快的顆粒將移至較慢的顆粒之前,即樣品以梯度區域分開。
      • 蛋白質沉淀物根據其沉淀系數和餾分通過在試管底部創建一個孔來收集。
      1. 等速離心
      • 將樣品與梯度形成溶液一起裝入試管中(在預先形成的梯度之上或之下,或與自形成梯度混合)
      • 生物樣品和銫鹽的溶液均勻地分布在離心管中,并在超速離心機中旋轉。
      • 在離心力的影響下,銫鹽從頂部到底部重新分布以形成密度梯度。
      • 粒子移動到其浮力密度等于梯度的那部分并形成帶的位置。也就是說,樣本分子移動到其密度等于梯度密度的區域。
      • 這是一個“真正的”均衡程序,因為它取決于彈性密度而不是速度
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